Pregătirea bibliotecilor NGS

Secvențierea de nouă generație necesită o pregătire atentă a materialului genetic înainte de reacția de secvențiere pentru a garanta rezultate fiabile. Secvențierea de înaltă capacitate se realizează pe fragmente de dimensiuni omogene, care prezintă la capetele lor secvențe scurte numite etichete, permițând definirea originii fragmentelor în timpul secvențierii simultane a mai multor probe, fixarea pe un suport solid și inițializarea reacției de secvențiere prin incorporarea de dNTP-uri marcate. Pentru a genera aceste fragmente care constituie ceea ce se numește o bibliotecă, există diferite abordări, cum ar fi, de exemplu: Pregătirea bibliotecilor prin fragmentare: materialul genetic este, în primul rând, tăiat în fragmente de dimensiuni diferite. Fragmentarea poate fi mecanică, chimică sau enzimatică. O selecție a fragmentelor este realizată în funcție de dimensiunea lor. Ultima etapă constă în adăugarea de etichete la...