PCR - BIOLOGIE MOLECULARĂ

Doriți să: - determinați o secvență pentru a identifica mutații (mutații punctuale (SNP-uri), inserții, deleții) - evaluați legăturile de rudenie între indivizi sau populații - evidențiați prezența unui organism dat într-un eșantion biologic - realizați un clonaj într-un vector de expresie pentru sinteza unei proteine recombinante... Aceste analize necesită, de obicei, o amplificare a materialului genetic printr-o reacție enzimatică numită PCR (Reacția de Polimerază în Lanț). Această reacție este, în general, realizată pe baza ADN-ului. Pentru anumite aplicații specifice, se folosește ca material de plecare ADNc obținut prin transcriere inversă a ARN-ului. Principiul metodei Moleculele de ADN, în starea lor naturală, sunt constituite din două fire complementare. Creșterea temperaturii peste 94 °C duce la separarea celor două fire de ADN și la distrugerea structurilor secundare (etapa de denaturare). Moleculele...